ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) - це молекулярно-біологічний метод, в основі якого лежить ампліфікація (тобто багаторазове збільшення) фрагментів ДНК у біоматеріалі.
Бажаєте здати аналізи, щоб перевірити стан свого здоров'я? Допоможе вам у цьому медична лабораторія Чернівці Ескулаб!
Метод ПЛР застосовується в багатьох сферах діяльності, у тому числі як швидкий і високоточний спосіб діагностики певних інфекційних і генетичних захворювань людини, а також для:
- виявлення спонтанних або успадкованих змін у ДНК,
- дослідженнях геному сільськогосподарських рослин і тварин для селекційних та інших завдань,
- у криміналістиці,
- археології,
- встановлення батьківства,
- клонування та секвенування геномів та інших сфер діяльності людини.
Віруси, бактерії та гриби – основні людські патогени – містять ДНК або РНК, причому для кожного виду послідовність нуклеотидів унікальна. Короткі фрагменти, що комплементарні цільовим ділянкам нуклеотидів кожного збудника, називаються праймерами.
В основі аналізу на ПЛР лежить створення більшої кількості копій генетичного матеріалу (ДНК або РНК) за допомогою цих праймерів і спеціальних ферментів за допомогою серії циклів нагрівання та охолодження. Отримані ампліфіковані сегменти далі методом гель-електрофорезу (або за допомогою іншої технології) порівнюються з іншими нуклеотидними сегментами відомого джерела (наприклад, патогенного мікроорганізму) для визначення їх ідентичності.
ПЛР в реальному часі - це різновид ПЛР, який дозволяє відстежувати процес ампліфікації в режимі реального часу і може використовуватися для кількісної оцінки присутньої ДНК/РНК. Це один з основних методів виявлення бактерій або вірусів на молекулярному рівні, з більш високим ступенем точності, ніж мікроскопічні або бактеріологічні дослідження, і значно швидше, ніж метод культивування.
Це також єдиний спосіб визначити наявність генетичних варіацій, що вказують на схильність до онкологічних та інших захворювань. Чутливість діагностичних інструментів для виявлення мутацій онкогенів і генів пригнічення пухлини була покращена принаймні в десять тисяч разів завдяки ПЛР, що дозволяє діагностувати, наприклад, такі види раку, як лейкемія. Метод ПЛР також дозволив розробити індивідуальну терапію для хворих на рак.
Крім того, ПЛР може використовуватися для типування тканин, що має життєво важливе значення для імплантації органів.
